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胞外囊泡NTA服务了解更多「科锐诺」 [科锐诺)]"内容：iTRAQ (isobarictags for relative and absolute quantitation，同位素标记相对和绝1对定量)是由AB SCIEX公司研发的一种体外同重同位素标记的相对与绝1对定量技术。该技术使用8种（或4种）不同的同位素试剂来同时标记和比较8种（或4种）不同的蛋白质样品。这些试剂由3个不同的化学标签组成：报告部分，肽反应部分和平衡部分。报告部分为客户可按需选择标记个数，肽反应基团将iTRAQ标签与肽段的N-端基团和每个赖氨酸侧链相连，可标记所有酶解肽段，平衡部位可保证iTRAQ试剂标记的不同样本的同一肽段具有相同的质荷比，因此改变任一iTRAQ试剂，不同同位素在标记同一多肽后在一级质谱检测，分子量都完全相同。而在串联质谱中，同重元素标记肽段平衡基团在二级质谱发生中性丢失。信号离子表现为不同质荷比的峰，因此，根据波峰的高度及面积，可以得到蛋白质的定量信息。

外泌体研究开展的如火如荼。不论是 SCI 文章的发表还是各类基1金的申请，外泌体相关研究表现都非常亮眼。外泌体提取后，研究人员面临的一个重要问题就是，我提取的是不是外泌体？如果是的话，质量如何？

现阶段，对外泌体进行鉴定主要有三种主流的方法：电镜、粒径和 Western blot 分析靶标物。之前我们已经对外泌体电镜进行了总结，今天我们来看看外泌体的粒径分析。

外泌体粒径分析原理

外泌体粒径分析方法为纳米颗粒跟踪分析（Nanoparticle tracking Analysis, NT A)，其原理是对每个颗粒的布朗运动进行追1踪和分析，结合 Stockes-Einstein 方程式计算出纳米颗粒的流体力学直径和浓度。NT A技术已被外泌体研究领域认可为外泌体表征手段之一。相较于其他表征方式，NT A技术的样本处理更简单、更能保证外泌体原始状态、检测速度更快。

NTA可以提供样本中颗粒的粒径分布和绝1对浓度，但不能够以NTA所提供的浓度数值这个单一的指标来定量外泌体。首先，我们必须理解NTA检测原理：该技术基于布朗运动，通过视频分析颗粒计数，可同时获取样本中颗粒的粒径和绝1对浓度。

因此，样本中的所有颗粒，都会被侦测并计入，而不能筛选出外泌体单独进行计数；同理：也不能通过NTA所提供的粒径分布情况这个单一的指标判断所提取出的内容物就是外泌体；例如下图为常见的粒径浓度分布图，可以说明所提取的内容物是在外泌体粒径范围内，但是否为外泌体还需要结合其他方法综合验证，譬如：透射电镜、western blot等。

以上信息由专业从事胞外囊泡NTA服务的科锐诺于2025/5/3 17:22:21发布

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