植物连续切片技术服务免费咨询科锐诺

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在显微镜下观察人体组织，必须将组织切成以微米为单位的薄片，使其透光并易于观察，但直接切取柔软组织是难以办到的。石蜡包埋法是将“支持物质”-石蜡渗入组织内部，而水与石蜡又是不相混合的，所以在浸蜡和包埋前必须将组织内所含的水分脱去。一般是浸入逐级增加浓度的酒精来完成。

由于酒精和石蜡不能混合，再用或冬青油置换出组织中的酒精，使其透明，然后放入融化的石蜡中。石蜡包埋--将浸蜡的组织块置于包埋框中，冷却后组织块便具有石蜡的硬度，切片机便能将组织切成薄片。切片进行连续切片，厚5μm左右，放入45℃漂烘仪内进行展片。待蜡片展平后进行裱片。将切片放置60C温箱3~5h，使切片粘贴牢固，待用。但是需要注意的是切片时必须保持切片刀锐利，切片要薄而平整、烤片的温度不宜过高，高温烤片对抗原有破坏作用。

常见的生物切片，厚度一般在几微米的程度，这种厚度制作起来比较简单，除了可以使用自动化的设备来切片之外，手动操作也能切到这种厚度，而且完够满足光学显微镜下观察的标准。不过在前沿的科研领域里，需要观察更细微的细胞结构，甚至需要从分子的层面来进行研究，这时候就需要用到电子显微镜。然而电子显微镜也需要更薄的样品，切片至少要达到0.1微米的厚度,而这种切片也就被称为是超薄切片,在很多实验研究里需要厚度达到50纳米，显然手I操作是无法达到这种厚度的。那么在实验环境下是怎样做成这种超薄生物切片的呢?首先是需要进行更好的固定,因为在如此薄的尺度之下，不但基本的细胞结构都已经被完全破坏，而且其中的细胞器也都被切开，里面的生物酶会释放出来，并且在很短的时间内使细胞结构遭到破坏。所以就需要在取得样品之后尽快进行固定，要求在一-分钟之内完成这项操作，然后再使用对应的材料来做透明化以及包埋，接下来还需要配合的切片机来完成切片的过程，从而达到理想的厚度。

切片厚度一般3～5微米。切片的要求是完整、薄、均匀。切下的片膜其大小形状应与组织块一致，切片的不完整，常会将重要病变遗漏，导致误诊、漏诊。在切片放蜡块时，应注意组织包埋的方向，组织的层次，纤维、肌肉等的走向应与切片刀平行，较难切的部分应放在上面，如皮肤的表皮，肿块的包膜，胃肠道的浆膜等，这样可以减少组织的断裂现象。操作切片机时应用力均匀，避免用力过重。对脱钙组织、，以及已知的钙化组织，应选用固定的刀口，以减少其他部位出现缺口的可能性。