湖北植物组织原位杂交欢迎来电「贝科新肽」

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荧光原位杂交技术（Fluorescence In Situ

Hybridization，FISH）利用核酸分子单链之间互补的碱基序列，通过标记的核酸探针与目标DNA或RNA进行杂交，进而定位和检测特定DNA序列的技术。探针标记可以采用荧光、或者生物素。FISH技术的基本原理是使用已知的标记单链核酸作为探针，按照碱基互补的原则，与待检材料中未知的单链核酸进行杂交，形成可被检测的杂交双链核酸。由于DNA分子在染色体上是沿着染色体纵轴呈线性排列，因此可以通过探针直接与染色体进行杂交，从而将特定的基因在染色体上定位。与传统的性标记原位杂交相比，FISH技术具有快速、检测信号强、杂交特异性高和可以多重染色等特点。该方法适用于植物染色体检测、土壤（泥巴）中细菌检测。

原位杂交技术原位杂交技术（In Situ Hybridization, ISH）是一种在生物样本（如组织切片、细胞涂片等）的原始位置上，通过核酸分子间的碱基互补配对原理，检测特定 DNA 或 RNA 序列的分子生物学技术。它能保留目标核酸在样本中的空间分布信息，是研究基因表达定位、染色体结构及病原体等的重要工具。一、技术原理原位杂交的原理是核酸分子的碱基互补配对：

探针设计：人工合成与目标核酸（DNA 或 RNA）序列互补的单链核酸片段（称为 “探针”），并对探针进行标记（如荧光、生物素等）。杂交反应：将标记的探针与经过处理的样本（含待检测核酸）孵育，探针通过碱基互补配对（A-T/U、G-C）与目标核酸特异性结合，形成杂交复合物。信号检测：通过检测探针上的标记物（如荧光信号、显色信号），定位目标核酸在样本中的位置和表达强度。

探针杂交将标记的探针溶液滴加于样本，在适宜温度（如 37-65℃）下孵育数小时至过夜，使探针与目标 RNA 特异性结合。洗涤用不同浓度的盐溶液洗涤样本，去除未结合的游离探针，降低背景信号。信号检测若为荧光探针：直接用荧光显微镜观察荧光信号；若为生物素 / 探针：通过亲和素 - 生物素复合物或结合标记物，再用酶（如辣根过氧化物酶）催化显色剂（如 DAB）产生可见信号。结果分析观察信号的位置（如细胞内、组织区域）、强度和分布，结合形态学特征解读结果。

生物学研究基因表达定位：研究胚胎发育中关键基因的 mRNA 在组织或细胞中的表达部位（如神经管发育相关基因）；神经科学：分析神经元中特定基因的表达模式，揭示神经环路功能；进化生物学：比较不同物种同源基因的表达差异，探究进化关系。农业与畜牧业检测作物或畜禽的病原体（如植物病毒、动物核酸）；研究作物抗逆基因的表达定位，优化育种策略。

以上信息由专业从事植物组织原位杂交的贝科新肽于2025/8/29 22:43:14发布

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