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原位杂交检测服务周到「在线咨询」

来源:贝科新肽 更新时间:2025-03-19 05:56:13

以下是原位杂交检测服务周到「在线咨询」的详细介绍内容:

原位杂交检测服务周到「在线咨询」 [贝科新肽)]"内容:

预杂交

1)每个管中置换成大约300ulHYB-溶液,60℃水浴5分钟,避免振荡。

2)用等体积的HYB+取代HYB-。

3)60℃水浴,预杂交4小时以上。

杂交

1)吸去预杂交的HYB+,加上100ul已加入探针的HYB+溶液(探针浓度约为1ng/ul)..

2)60℃ 温浴过夜。

 注:杂交与预杂交的温度可以是55到60度不等,温度越低,探针结合越好,温度越高,背景越小。

在原位杂交过程中,需要使用标记的核酸探针,通常是在性核素或非性物质中标记的。这些探针可以通过不同的方式制备,例如从已知序列的DNA或RNA制备,或者通过使用生物信息学方法设计和合成新的探针。

在进行原位杂交时,细胞或组织需要固定在适当的支持物上,例如载玻片。然后,探针与细胞或组织中的DNA或RNA进行杂交,通常是在加热条件下进行的。接下来,通过洗涤和显影步骤去除未结合的探针和信号增强剂,后用显微镜观察杂交信号的位置。

FISH技术的基本步骤包括探针制备、样品预处理、探针与样品的杂交、信号检测和图像分析等。在探针制备过程中,使用荧光标记物代替同位素标记物来标记探针。在样品预处理过程中,细胞或组织的固定、裂解和去除非特异性蛋白质等操作都是必要的,以提高探针与目标序列的亲和力和特异性。在探针与样品的杂交过程中,探针与样品中的目标序列进行互补性杂交,形成可检测的荧光信号。在信号检测和图像分析过程中,使用高灵敏度荧光显微镜检测荧光信号并获取高分辨率的细胞图像。

以上信息由专业从事原位杂交检测的贝科新肽于2025/3/19 5:56:13发布

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主营:原位杂交,亚细胞定位,蛋白互作,启动子筛选

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