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湖北原位杂交检测欢迎来电「贝科新肽」

来源:贝科新肽 更新时间:2025-02-21 07:36:58

以下是湖北原位杂交检测欢迎来电「贝科新肽」的详细介绍内容:

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原位杂交技术的原理是什么?有何用途

原位杂交技术的原理是利用核酸分子单链之间有互补的碱基序列,将有性或非性的外源核酸(即探针)与组织、细胞或染色体上待测DNA或RNA互补配对,结合成专一的核酸杂交分子,经一定的检测手段将待测核酸在组织、细胞或染色体上的位置显示出来。为显示特定的核酸序列要具备3个重要条件:组织、细胞或染色体的固定、具有能与特定片段互补的核苷酸序列(即探针)、有与探针结合的标记物(曾呈奎等2000)。

原位杂交技术方法大致可分为:1.杂交前准备,包括固定、取材、玻片和组织的处理,如何增强核酸探针的穿透性、减低背景染色等;2.杂交;3.杂交后处理;4.显示(visualization):包括性自显影和非性标记的显色。固定原位杂交组织化学技术在固定剂的应用和选择上应兼顾到三个方面:保持细胞结构,限度地保持细胞内DNA或RNA的水平;使探针易于进入细胞或组织。DNA是比较稳定的,mRNA是相对稳定的但易为酶合成和降解。RNA却绝然不同,非常容易被降解。因此,对于DNA的定位来说,固定剂的种类和浓度并不十分重要。相反,在RNA的定位上,如果要使RNA的降解减少到低限度,那么,不仅固定剂的种类浓度和固定的时间十分重要,而且取材后应尽快予以冷冻或固定。

怎样保证原位杂交实验操作时的温度?

建议仪器操作,人工操作的话要注意:

(1)对荧光原位杂交操作过程中可能使用的一些仪器进行温控检查,不符合要求的进行更换。

(2)尽可能地保持环境温度在20度以上。

(3)针对需要预热以达到要求温度的试剂,在使用前必须使用温度计对其进行测温。

(4)同时检测的样本不超过4块,操作一定要迅速,实验人员要注意一些小部件的温度,尤其是在冬季。

以上信息由专业从事原位杂交检测的贝科新肽于2025/2/21 7:36:58发布

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武汉贝科新肽科技有限公司
主营:原位杂交,亚细胞定位,蛋白互作,启动子筛选

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