原位杂交技术的原理是什么?有何用途
原位杂交技术的原理是利用核酸分子单链之间有互补的碱基序列,将有性或非性的外源核酸(即探针)与组织、细胞或染色体上待测DNA或RNA互补配对,结合成专一的核酸杂交分子,经一定的检测手段将待测核酸在组织、细胞或染色体上的位置显示出来。为显示特定的核酸序列要具备3个重要条件:组织、细胞或染色体的固定、具有能与特定片段互补的核苷酸序列(即探针)、有与探针结合的标记物(曾呈奎等2000)。
把滤膜放在纸巾上于室温晾干后,把滤膜(编号面朝上)放在一张保鲜膜上,并在保鲜膜上作几个不对称的标记,以使滤膜与性自显影片位置对应。
用第二张保鲜膜盖住滤膜。加光片并加上增感屏于-70℃曝光12-16小时。
底片显影后,在底片上贴一张透明硬纸片。在纸上标记阳性杂交信号的位置,同时在不对称分布点的位置上作出标记。可从底片上取下透明纸,通过对比纸上的点与琼脂上的点来鉴定阳性菌落。
原位杂交是一项非常重要的生物技术,可以用于研究基因表达和调控,检测基因变异和染色体异常,监测细胞生长和凋亡,以及识别特定的细胞类型或组织。然而,它需要特殊的操作技术和设备,以及严格的对照实验才能获得可靠的结果。
原位杂交的基本原理是利用标记的核酸探针与细胞或组织中的DNA或RNA进行杂交,然后通过检测标记来识别探针的位置。这使得研究人员能够在细胞或组织中确定特定基因或基因组区域的位置和表达水平。
原位杂交可以用于多种类型的实验。例如,它可以用来检测特定基因在发育过程中的表达模式,或者确定特定基因变异在细胞中的分布。此外,原位杂交还可以用于诊断疾病,例如某些类型的,以及监测效果。
以上信息由专业从事荧光原位杂交的贝科新肽于2025/2/19 13:13:25发布
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