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染色体原位杂交信息推荐「在线咨询」

来源:贝科新肽 更新时间:2025-01-04 11:01:59

以下是染色体原位杂交信息推荐「在线咨询」的详细介绍内容:

染色体原位杂交信息推荐「在线咨询」 [贝科新肽)]"内容:杂交 (1) 盛有2×SSC的塑料盘同,将干烤的滤膜飘浮在液面上,浸湿5分钟。(2) 将滤膜转到200ml预洗液的玻璃皿中。滤膜何叠在一起,放于溶液中。用保鲜膜盖住玻璃皿,放到位于培养箱内的旋转平台上。于50℃处理30分钟。在这一步及以后的所有步骤中,应缓缓摇动滤膜,防止它们粘在一起。(3) 用泡过预洗液的吸水棉纸轻轻地从膜表面拭去细菌碎片,以降低杂交背景而不影响阳性杂交信号的强度和清晰度。(4) 将滤膜转到盛有150ml预杂交液的玻璃中,在适宜温度(即在水溶液中杂交时用68℃,而在50%甲酰胺中杂交时用42℃)下,预杂交1-2小时。

植物组织原位杂交的步骤包括以下几个方面:

1. 制备组织样品:从植物中取出需要研究的组织样品,如根、茎、叶等。

2. 固定组织样品:将组织样品固定在载玻片上,通常使用或乙醇等化学物质进行固定。

3. 处理组织样品:对固定的组织样品进行脱水、透明化、脱脂等处理,以便于DNA探针的穿透和结合。

4. 制备DNA探针:根据需要研究的基因序列,设计并合成DNA探针。DNA探针可以标记荧光染料或性同位素,以便于检测。

5. 杂交DNA探针:将DNA探针与组织样品进行杂交,通常需要在高温下进行,以便于DNA探针与RNA或DNA结合。

6. 检测杂交信号:通过荧光显微镜或计数器等设备,检测DNA探针与RNA或DNA的结合情况,确定目标基因的表达模式和位置。

荧光原位杂交(FISH)技术具有以下优点:

高特异性:荧光探针的合成是定向的,保证了杂交过程的特异性,可以有效地降低非特异性杂交和背景干扰。

高灵敏度:荧光信号的检测比性信号的检测更灵敏,可以检测出低拷贝数的DNA序列,甚至可以检测单个基因序列。

快速简便:FISH技术操作简便,杂交过程可以在数小时或数天内完成,而且不需要过于复杂的设备,便于在实验室开展。

以上信息由专业从事染色体原位杂交的贝科新肽于2025/1/4 11:01:59发布

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