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原位杂交试剂电话 武汉思特进科技公司

来源:思特进 更新时间:2021-10-12 00:23:31

以下是原位杂交试剂电话 武汉思特进科技公司的详细介绍内容:

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原位杂交;原位杂交(in situ hybridization)将标记的核酸探针与细胞或组织中的核酸进行杂交,称为原位杂交!

使用DNA或者RNA探针来检测与其互补的另一条链在细菌或其他真核细胞中的位置。

以菌落原位杂交为例:对分散在若干个琼脂平板上的少数菌落(100-200)进行克8隆筛选时,可采用本方法。将这些菌落归并到一个琼脂主平板以及已置于第二个琼脂平板表面的一张硝5酸纤维素滤膜上。经培养一段时间后,对菌落进行原位裂解。主平板应贮存于4℃直至得到筛选结果。

原位杂交技术可应用于什么方面

1.细胞特异性mRNA转录的定位 可用于基因图谱、基因表达和基因组进化的研究。

2.感6染组织中病毒DNA/RNA的检测和定位,如EB病毒mRNA、人类乳3头状瘤病毒和巨细胞病毒DNA的检测。

3.癌基因、抑癌基因及各种功能基因在转录水平的表达及其变化的检测。

4.基因在染色体上的定位。

5.检测染色体的变化,如染色体数量异常和染色体易位等。

6.分裂间期细胞遗传学的研究,如遗传病的产前诊断和某些遗传

原位杂交中探针的选择

DNA探针、RNA探针和寡核苷酸探针均能通过不同的酶促分子反应进行标记。寡核苷酸探针的长度较短,因此避免了探针内部退火的问题,在杂交时的渗透能力也更好,探针与靶标的接触这是影响原位杂交是否成功的重要因素之一。DNA探针、RNA探针在合成时需要控制探针片段长度,通常300-1000bp左右,能覆盖到较长片段的靶核酸序列,增加检测的灵敏度。

总的来说,随探针浓度增加,杂交率也增加。另外,在较窄的范围内,随探针浓度增加,敏感性增加。依我们的经验,要获得较满意的敏感性,膜杂交中32P标记探针与非放0射性标记探针的用量分别为5~10 ng/ml和25~1000ng/ml,而原位杂交中,无论应用何种标记探针,其用量均为0.5~5.0μg/ml。探针的任何内在物理特性均不影响其使用浓度,但受不同类型标记物的固相支持物的非特异结合特性的影响。

以上信息由专业从事原位杂交试剂的思特进于2021/10/12 0:23:31发布

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