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洋葱亚细胞定位方法电话

来源:思特进 更新时间:2020-10-24 17:19:21

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武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、细菌、细胞等生物实验。花期的调控与植物的生物量有着密切的关系,在中国农业发展历史中,农业生产者通过打顶技术来控制作物的开花进而来提高作物的产量已在农业生产中发挥着重要的作用。

分别用70%乙醇和灭菌蒸馏水清洗金粉(直径为1 μm),加入灭菌蒸馏水制成金粉悬浮液,取100 μL 放在含有1.0 cm2 洋葱表皮的玻璃皿中,边振荡边加入10 μL pCambia2301-GaMYB2-GFP质粒,逐步加入40 μL 0.1 mol·L-1 亚精胺和100 μL2.5 mol·L-1 CaCl2,振荡混匀。构建PnCHI1的亚细胞定位载体,转入洋葱表皮细胞中瞬时表达,在激光扫描共聚焦显微镜下发现PnCHI1定位于细胞壁中。基因GDS-80轰击时氦气罐的气压为1 300 psi,取10 μL DNA 包裹好的微粒悬浮液加到基因中央,进行轰击,之后放置25℃避光过夜培养,使用ConfocalLaser激光共聚焦显微镜观察。

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多胺作为一种多聚阳离子,在基因表达、蛋白活性等多层面调节细胞功能。多胺转运蛋白能够特异性介导多胺类物质跨膜运输,在调节多胺浓度、调控抗性基因表达、维持mRNA水平、增强植物抗逆性等方面具有重要功能。1、MTR_8g079250的亚细胞定位构建MTR_8g079250的洋葱表皮亚细胞定位载体,通过基因枪轰击转化洋葱表皮细胞,在激光共聚焦显微镜下观察到MTR_8g079250::GFP融合蛋白主要在细胞膜上表达,在细胞核上也有微量的表达。目前,已知拟南芥(Arabidopsis thaliana)LHR1基因编码质膜多胺转运蛋白AtPUT3,控制多胺的吸收,参与植物热胁迫早期反应中的分子调控过程,但水稻中(Oryza sativa),多胺参与植物热胁迫早期反应的具体分子机制尚不明确。通过序列对比,发现水稻Os02g47210和Os03g37984是拟南芥AtPUT3的功能同源基因。为了初步阐明水稻多胺转运蛋白LHR1在热胁迫早期防御反应及提高植物耐热性上的功能,本研究利用生物信息学、生化与分子生物学实验、遗传学等手段对水稻LHR1同源基因的功能进行初步研究,结果如下:1.了水稻OsLHR1(Os03g37984.1、2、3和Os02g47210)基因全长CDS,并对该基因编码的蛋白质进行有效的生物信息学分析,结果显示:Os03g37984有5种不同的剪切方式,编码5种OsPUT3蛋白。

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盾叶薯蓣(Dioscorea zingiberensis C.H.Wrigh t),是我国特有的甾体类药源植物,也是世界上薯蓣皂甙元含量的资源植物。近些年,由于人类的过度采挖,野1生盾叶薯蓣资源濒临枯竭,而人工栽培种存在皂甙元含量降低,种质退化等问题。本文将对紫花苜蓿苜蓿皂甙合成途径中关键酶基因进行筛选、和功能分析,为苜蓿品质改良及选育新品种提供新的理论依据。细胞和基因工程技术可望为盾叶薯蓣的品种改良提供一个新的途径。本实验筛选了盾叶薯蓣易组织培养的基因型,并以其三种外植体—幼胚诱导的胚性愈伤,花序愈伤和花序作为转化受体,研究了根癌农介导的盾叶薯蓣转化的各种影响因素,获得了植株,初步建立了根癌农介导的盾叶薯蓣转化体系,为通过技术对其进行品种改良的研究奠定了技术基础。

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选取含有氯嘧磺隆抗性标记的ILV1基因和报告基因GFP二元载体的农AGL-1,采用单因子和双因子方法研究根癌农AGL-1介导柱花草菌CH008转化过程中各主要因素对转化率的影响,优化构建ATMT转化柱花草胶孢菌体系条件,使转化效率达到300~400个转化子/106个孢子,即根癌农AGL-1浓度OD600=0.8,菌分生孢子浓度为1×106个/mL,AS浓度为100 μmol/L,诱导时间为6 h,共培养温度和时间分别为25 ℃和4 d。由于其编码蛋白的N-端具有高度保守的WRKYGQK氨基酸残基序列,人们将其命名为WRKY。经PCR检测都有GFP片段,并能够表达绿色荧光蛋白。这为进一步开展菌对柱花草的致病机理研究提供了依据,优化转化体系有利于后续突变体库的扩大、筛选突变体和致病功能基因的研究。

以上信息由专业从事洋葱亚细胞定位方法的思特进于2020/10/24 17:19:21发布

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