据国际细胞外囊泡学会(ISEV)在2014年的提议,外泌体鉴定3个标志:透射电镜(transmission electron microscope,TEM)、粒径(Nanoparticle Tracking Analysis, NTA)、蛋白标志物(Western Blot, WB)。
外泌体透射电镜TEM鉴定外泌体大小、形态,判断样本是否含有外泌体。
外泌体透射电镜分辨率为0.1~0.2nm,适合外泌体双层囊膜超微结构观察,可观测样本中是否存在外泌体样结构(通常为茶托型或一侧凹陷的半球形),同时可测量外泌体大小。
检测平台:TecnaiTM G2 Spirit BioTWIN
检测结果:三张透射电镜图片,尽可能体现完整的外泌体形态(如有)
检测周期:10-15个工作日
NTA可以提供样本中颗粒的粒径分布和绝1对浓度,但不能够以NTA所提供的浓度数值这个单一的指标来定量外泌体。首先,我们必须理解NTA检测原理:该技术基于布朗运动,通过视频分析颗粒计数,可同时获取样本中颗粒的粒径和绝1对浓度。
因此,样本中的所有颗粒,都会被侦测并计入,而不能筛选出外泌体单独进行计数;同理:也不能通过NTA所提供的粒径分布情况这个单一的指标判断所提取出的内容物就是外泌体;例如下图为常见的粒径浓度分布图,可以说明所提取的内容物是在外泌体粒径范围内,但是否为外泌体还需要结合其他方法综合验证,譬如:透射电镜、western blot等。
促进组织修复和再生。近年的研究发现,干细1胞来源外泌体是干细1胞旁分泌活动的一种重要方式,可介导其促进组织再生。Chen等发现,ADSCs-exo的联合治1疗可减少大鼠急性缺血性卒中的梗死面积,促进神经功能恢复。ADSCs-exo可以避免干细1胞治1疗的免1疫排斥、伦1理问题等缺点,且具有高稳定性、易于储存、无需增殖、便于定量使用等优势,与单一的细1胞1因子比较,具有较高的安全性和更大的组织再生潜能。如果癌细胞来源的外泌体进入单核细胞,通过外泌体内所含的TGF-β或前1列腺素E2等的作用,单核细胞会被诱导分化为髓源性免1疫抑制细胞。髓源性免1疫抑制细胞释放出IL-10等各种免1疫抑制分子,抑制免1疫细胞活化或抑制T细胞的诱导,从而抑制抗肿1瘤免1疫。癌细胞通过利用抑制免1疫细胞攻击自身这一机制,进而促进癌1症的发展。以上信息由专业从事胞外囊泡粒径及浓度服务的科锐诺于2024/5/1 6:10:55发布
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