预杂交
1)每个管中置换成大约300ulHYB-溶液,60℃水浴5分钟,避免振荡。
2)用等体积的HYB+取代HYB-。
3)60℃水浴,预杂交4小时以上。
杂交
1)吸去预杂交的HYB+,加上100ul已加入探针的HYB+溶液(探针浓度约为1ng/ul)..
2)60℃ 温浴过夜。
注:杂交与预杂交的温度可以是55到60度不等,温度越低,探针结合越好,温度越高,背景越小。
原位杂交是一种生物学技术,它可以在细胞或组织中特定部位检测DNA或RNA的存在,而不需要将DNA或RNA分离出来。这项技术使用标记的DNA或RNA探针,与细胞或组织中的相应DNA或RNA进行特异性结合,然后通过光学显微镜或电子显微镜观察探针的位置和数量。
原位杂交的原理很简单。DNA或RNA分子具有互补的核苷酸序列,因此可以通过氢键相互结合。将标记的DNA或RNA探针与细胞中的DNA或RNA进行杂交,可以特异性地检测这些探针的位置和数量。探针的数量和位置可以反映DNA或RNA在细胞中的水平和分布。
原位杂交技术还在以下生物领域有应用:
生态学和环境科学:在生态学和环境科学领域,原位杂交技术可以用于研究生物与环境之间的相互作用。例如,通过标记特定基因的探针,可以检测环境中微生物种群的分布和变化,进而研究其对环境的影响和作用。
进化生物学:在进化生物学领域,原位杂交技术可以用于研究物种之间的遗传差异和进化关系。例如,通过比较不同物种之间基因序列的差异,可以揭示物种之间的亲缘关系和进化历程。
以上信息由专业从事植物组织原位杂交的贝科新肽于2024/5/9 10:22:59发布
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